Resumen
La siguiente práctica se realizo con
el fin de extraer ácidos nucleicos a
partir de tejido vegetal ADN, mediante
un método casero. El método que se utilizo en el laboratorio es una
sencilla técnica para poder realizar la extracción de ADN de un tejido vegetal
en este caso se utilizo la cebolla cabezona por su componente que posee, que es
mucho mas fácil para poder visualizarlo,
la célula hay es donde se puede sacar el
material genético necesario para poder liberar el ADN del núcleo.
El alcohol se utiliza para concentrar el ADN, ya que
éste es soluble en agua, pero
cuando se encuentra en alcohol, se
desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Por medio de
este método se obtuvo resultados de suficiente ADN donde se puede observar en
una en un tubo de ensayo.
Palabras Claves:
ADN: Es una molécula de doble cadena que se dobla en una hélice como una escalera en
espiral. Esta formada por unidades simples conectadas entre si, los
nucleótidos.
EXTRACCION DE ADN: requiere una
serie de etapas básicas: En primer lugar tiene que romperse la pared celular y
la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A
continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.
TEJIDO VEGETAL: son un conjunto de células de la misma condición,
unidas unas con otras más o menos sólidamente y de manera perdurable para
formar conjuntos macizos o por lo menos laminares, y que tengan algún cometido
en común.
INTRODUCCION
El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher,
biólogo suizo, en los núcleos de las células del pus obtenidas de los vendajes
quirúrgicos desechados y en el esperma del salmón. El llamo a la sustancias nucleica,
aunque no fue reconocida hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald
Aver.
ADN es la abreviatura del acido desoxirribonucleico (en ingles, DNA) que
esta formado por un azúcar (desoxirribosa), una base nitrogenada que puede ser
adenina (A), timina (T), citosina (C) y guanina (G) y un grupo fosfato.
Constituye el material genético de los organismos. Su estructura es una pareja
de largas cadenas de nucleótidos. La estructura de doble hélice del ADN fue
descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga hebra de acido
nucleico esta enrollada alrededor de otra hebra formando un par entrelazado.
Dicha hélice mide 3,4 nm de paso de rosca y 2,37 nm de diámetro, y esta
formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de nucleótidos enfrentados entre si por
sus bases nitrogenadas.
OBJETIVOS
Objetivo
general:
Utilizar
una sencilla técnica para poder extraer el ADN de un tejido vegetal.
Objetivos
específicos:
ü Extraer el
material genético (ADN) de una cebolla cabezona.
ü Establecer la
relación entre el proceso de extracción
y propiedades físicas y químicas del ADN.
ü Observar la
estructura fibrilar del ADN.
MATERIALES Y MÉTODOS
Los materiales que se utilizaron son los siguientes.
·
GUANTES
·
CEBOLLA CABEZONA
·
BEAKER
·
MORTERO Y PISTILO
·
2 FILTROS DE PAPEL
·
AGUA DESTILADA
·
DETERGENTE ( SHAMPOO)
·
NACL
·
ETANOL
·
TUBOS DE ENSAYO
·
PIPETA
·
1 VARILLA DE VIDRIO
El método que se utilizo es una sencilla
técnica para poder realizar la extracción de DNA de un tejido vegetal.
Para llevar a cabo la extracción de
ADN hay que realizar una serie de procedimientos básicos.
En primer lugar tienen que romperse
la pared celular y la membrana
plasmática del tejido vegetal para así
poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse
también la membrana nuclear para dejar
libre el ADN. Por ultimo hay que puedan proteger el ADN de enzimas o
agentes externos que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que
precipite en alcohol.
Paso
1: se
preparo la solución amortiguadora realizando una mezcla homogénea de 44 ml agua
Paso 2:
En la solución se agregaron 5 gr de NACL
(cloruro de sodio) y se homogenizo. La mezcla tomo un color mucho mas claro
que indica la alta salinidad del
compuesto.
Paso 3: En un mortero se realizo el macerado de la mitad del tamaño de
tejido vegetal o muestra durante aproximadamente 20 minutos.
Paso 4:
Posterior a esto se agregó el macerado (que debió tener características
similares a un puré) en la solución
amortiguadora.
Paso 5:
Se procedió a mezclar dejando luego en absoluto reposo durante 10 minutos.
Paso 6:
En un embudo de cristal se posiciono un filtro de café para la realizar la
filtración de la mezcla.
Paso 7:
Se dejan drenar al tubo de ensayo 10 ml.
Paso 8:
En un tubo de ensayo se tomaron 5 ml de alcohol etílico C2H5OH al 95 % de pureza.
Paso 9:
Esos 5 ml de alcohol son adicionados al tubo de ensayo que contiene 10 ml del
filtrado.
Paso 10:
Dejar en reposo la muestra durante 3 minutos para que el material genético sea
percibible al ojo humano.
Paso 11:
Luego del tiempo esperado se observan los resultados de la practica de
laboratorio en el tubo de ensayo, el cual muestra gran cantidad de micro partículas alargadas que
reciben el nombre del ADN (acido desoxirribonucleico).
ANÁLISIS Y CONCLUSIONES
Mediante un método especifico casero se pudo obtener
ADN, por esto la ciencia a avanzado con pasos grandísimos nos demuestra de como
podemos extraer material genético de una manera que cualquier persona los pueda
realizar con materiales de fácil acceso.
Ø Se realizó los diferentes procedimientos para
hacer la extracción del ADN de un tejido vegetal “cebolla cabezona”
Ø Se identificaron de
manera espontanea cuáles fueron las sustancias
que se utilizaron a la extracción del ADN.
Ø Se observó la estructura del ADN de la cebolla
cabezona después de centrifugarse.
Ø Se obtuvo los resultados de la molécula del
ADN del tejido vegetal (cebolla cabezona).
....
ResponderEliminar